陽(yáng)性對(duì)照材料是實(shí)驗(yàn)中用于驗(yàn)證檢測(cè)方法有效性、判定結(jié)果可靠性的核心標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),其攜帶的目標(biāo)病原體或活性成分易引發(fā)交叉污染,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。防止交叉污染需圍繞分裝無(wú)菌化、儲(chǔ)存隔離化、使用規(guī)范化三大原則,建立全流程管控體系,具體操作指南如下:
分裝是防控交叉污染的首道防線,需在生物安全柜(BSC)內(nèi)完成,避免材料與環(huán)境、操作人員及其他實(shí)驗(yàn)樣本接觸。
1.分裝前準(zhǔn)備
-提前30分鐘開(kāi)啟生物安全柜紫外燈消毒,通風(fēng)10分鐘后使用;操作人員穿戴防護(hù)服、無(wú)菌手套、口罩與護(hù)目鏡,嚴(yán)格執(zhí)行手消毒流程。
-準(zhǔn)備無(wú)菌凍存管、移液器、吸頭(帶濾芯)等器具,所有器具需經(jīng)高壓蒸汽滅菌或γ射線滅菌,避免器具攜帶雜質(zhì)或微生物。
-依據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,將對(duì)照材料按單次使用量進(jìn)行分裝,避免反復(fù)凍融與多次取樣,減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
2.分裝操作規(guī)范
-開(kāi)啟生物安全柜內(nèi)照明燈與風(fēng)機(jī),保持氣流穩(wěn)定;將陽(yáng)性對(duì)照母液、無(wú)菌凍存管放置于安全柜操作區(qū),嚴(yán)禁放置在回風(fēng)口氣柵上方。
-使用帶濾芯的無(wú)菌吸頭吸取母液,移液器垂直操作,避免液體濺出;每吸取一次更換一個(gè)吸頭,嚴(yán)禁吸頭重復(fù)使用。
-分裝完成后,立即旋緊凍存管蓋,用封口膜密封管口,貼好標(biāo)簽,標(biāo)注材料名稱、濃度、分裝日期、有效期與生物危害等級(jí)。
-操作結(jié)束后,用75%乙醇擦拭安全柜內(nèi)壁、臺(tái)面及器具表面,關(guān)閉安全柜時(shí)先關(guān)風(fēng)機(jī),再關(guān)紫外燈,做好操作記錄。
二、陽(yáng)性對(duì)照材料的儲(chǔ)存:分類隔離,降低污染風(fēng)險(xiǎn)
陽(yáng)性對(duì)照材料的儲(chǔ)存需遵循分區(qū)、分類、專人管理原則,防止與陰性樣本、其他實(shí)驗(yàn)材料混放導(dǎo)致交叉污染。
1.儲(chǔ)存分區(qū)管理
-實(shí)驗(yàn)室冰箱/液氮罐需劃分陽(yáng)性對(duì)照專用儲(chǔ)存區(qū),與陰性樣本區(qū)、普通試劑區(qū)嚴(yán)格隔離,張貼醒目的生物危害標(biāo)識(shí)。
-不同類型的對(duì)照材料(如病毒、細(xì)菌、核酸)分開(kāi)存放,高致病性材料需單獨(dú)存放于雙鎖冰箱內(nèi),由專人負(fù)責(zé)保管,嚴(yán)格執(zhí)行領(lǐng)用登記制度。
2.儲(chǔ)存條件控制
-根據(jù)材料特性選擇合適的儲(chǔ)存溫度:短期儲(chǔ)存(1周內(nèi))可置于2–8℃冷藏;長(zhǎng)期儲(chǔ)存(數(shù)月至數(shù)年)需置于-20℃或-80℃冷凍,核酸類陽(yáng)性對(duì)照可加入穩(wěn)定劑后保存,避免降解。
-凍存管需放置在密封的凍存盒內(nèi),防止冰箱內(nèi)冷凝水滲入或材料泄漏;液氮儲(chǔ)存時(shí)需使用液氮專用凍存管,做好防液氮滲漏防護(hù)。
-定期檢查儲(chǔ)存設(shè)備溫度,做好溫度記錄;發(fā)現(xiàn)溫度異常時(shí),及時(shí)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性對(duì)照材料,避免材料失活或污染擴(kuò)散。

三、陽(yáng)性對(duì)照材料的使用:規(guī)范操作,杜絕污染擴(kuò)散
陽(yáng)性對(duì)照材料的使用環(huán)節(jié)是交叉污染的高發(fā)點(diǎn),需嚴(yán)格遵循專用器具、分區(qū)操作、及時(shí)消毒的要求。
1.使用前準(zhǔn)備
-領(lǐng)用對(duì)照材料時(shí),核對(duì)標(biāo)簽信息,檢查包裝是否完好、有無(wú)泄漏;若發(fā)現(xiàn)包裝破損,立即進(jìn)行無(wú)害化處理,嚴(yán)禁使用。
-準(zhǔn)備專用的移液器、吸頭、離心管等器具,嚴(yán)禁與處理陰性樣本的器具混用;實(shí)驗(yàn)臺(tái)面鋪設(shè)一次性無(wú)菌墊,便于后續(xù)清潔消毒。
2.使用操作規(guī)范
-陽(yáng)性對(duì)照的加樣操作需最后進(jìn)行,避免先處理陽(yáng)性材料再處理陰性樣本導(dǎo)致污染。
-加樣過(guò)程中保持移液器垂直,避免液體飛濺;若發(fā)生溢灑,立即用75%乙醇覆蓋污染區(qū)域,靜置15分鐘后擦拭,更換污染的實(shí)驗(yàn)墊與手套。
-實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,所有接觸過(guò)陽(yáng)性對(duì)照的器具需單獨(dú)放置于生物危害垃圾袋內(nèi),經(jīng)高壓蒸汽滅菌后再清洗或丟棄;實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器用75%乙醇消毒。
3.廢棄物處理
-陽(yáng)性對(duì)照材料的剩余液、廢棄吸頭、離心管等廢棄物,需放入專用生物危害垃圾袋,密封后進(jìn)行高壓滅菌處理,嚴(yán)禁隨意丟棄。
-實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢液需經(jīng)消毒處理達(dá)標(biāo)后,方可排入實(shí)驗(yàn)室污水處理系統(tǒng)。
陽(yáng)性對(duì)照材料的交叉污染防控是一個(gè)全流程的系統(tǒng)工程,通過(guò)嚴(yán)格執(zhí)行分裝無(wú)菌化、儲(chǔ)存隔離化、使用規(guī)范化的操作要求,可最大限度降低污染風(fēng)險(xiǎn),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。